掌握超濾離心管正確使用方法是保障實(shí)驗(yàn)成功的關(guān)鍵
點(diǎn)擊次數(shù)：62 更新時間：2025-12-01
超濾離心管是一種集離心與膜分離技術(shù)于一體的實(shí)驗(yàn)室耗材，廣泛應(yīng)用于蛋白質(zhì)濃縮、脫鹽、緩沖液置換、核酸純化及小分子去除等生物化學(xué)操作。其核心為內(nèi)置特定截留分子量的超濾膜，通過離心力驅(qū)動樣品透過膜孔，實(shí)現(xiàn)目標(biāo)分子的高效分離。然而，若操作不當(dāng)，易導(dǎo)致膜堵塞、樣品損失、回收率低甚至管體破裂。掌握其正確使用方法，是保障實(shí)驗(yàn)成功的關(guān)鍵。
一、使用前準(zhǔn)備
按分子量精準(zhǔn)選膜：目標(biāo)大分子應(yīng)大于MWCO的2–3倍，小分子雜質(zhì)小于1/2MWCO，確保有效截留與透過；
潤濕膜面（必要時）：對疏水性膜（如PVDF），先加入少量緩沖液或乙醇潤濕5分鐘，再離心去除，避免氣阻影響流速；
檢查管體完整性：確認(rèn)濾膜無破損、管蓋密封圈完好，避免離心泄漏。
二、樣品加載規(guī)范
控制上樣體積：通常不超過離心管最大容量的75%（如15mL管加樣≤11mL），預(yù)留濃縮空間；
預(yù)澄清處理：含顆粒或細(xì)胞碎片的樣品需先低速離心（如3,000×g，5min）或過濾，防止膜孔堵塞；
避免高粘度或高濃度直接上樣：可適當(dāng)稀釋，提升初始通量。
三、離心參數(shù)設(shè)置
參照廠家推薦轉(zhuǎn)速：通常3,000–5,000×g，嚴(yán)禁超速（查看管壁標(biāo)注的最大RCF值）；
設(shè)定合適時間：分階段離心（如每次10–15分鐘），觀察濃縮液體積，避免干膜；
低溫操作：對熱敏蛋白，使用4℃冷凍離心機(jī)，防止變性。
四、濃縮與洗滌操作技巧
緩沖液置換：當(dāng)濃縮至約100–200μL時，加入等體積新緩沖液，混勻后再離心，重復(fù)2–3次可去除＞95%小分子雜質(zhì)；
避免膜干涸：濃縮終點(diǎn)保留至少50μL液體，干膜將不可逆降低回收率；
輕柔混勻：用移液器緩慢吹打，勿劇烈震蕩損傷大分子。
五、回收與清潔（若為可重復(fù)使用型）
多數(shù)超濾離心管為一次性設(shè)計(jì)，但部分型號可重復(fù)使用；
使用后立即用去離子水沖洗，再用0.1MNaOH或?qū)Ｓ们逑匆航?，去除殘留?/div>
嚴(yán)禁高壓滅菌或烘干，以免膜結(jié)構(gòu)變形。
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